Le soir du 25 février 1964, quatre icônes du sport, du divertissement et de l'activisme ont célébré l'un des plus grands bouleversements de l'histoire de la boxe dans une modeste chambre de motel à Miami. Après avoir remporté le titre mondial des poids lourds pour la première fois, Cassius Clay (Eli Goree) - qui allait bientôt changer son nom en Muhammad Ali - s'est réuni avec trois amis : le militant des droits de l'homme Malcolm X (Kingsley Ben-Adir), la superstar de la musique Sam Cooke (Leslie Odom Jr.) et la légende du football et héros émergent du film d'action Jim Brown (Aldis Hodge).

One Night In Miami… est une imagination fictive de la nuit historique que ces figures imposantes ont passée ensemble. À l'insu des autres, Malcolm X, qui est sur le point de se lancer dans une nouvelle entreprise audacieuse qui le mettra en grave danger personnel, a organisé le rassemblement dans l'espoir de gagner le soutien de Clay. Alors que la soirée progresse de manière surprenante, les quatre hommes s'engagent dans un débat passionné sur leurs rôles de célébrités et de dirigeants à un moment charnière du mouvement des droits civiques.